逆轉(zhuǎn)錄病毒載體
MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒基因表達載體系統(tǒng)是一種非常高效的，能把外源基因穩(wěn)定整合到哺乳動物細胞基因組的系統(tǒng)，也是在iPS細胞制備中特別受歡迎的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法。
MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒載體來源于莫洛尼（氏）鼠白血病病毒，屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒家族，野生型逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組是線性雙正鏈RNA。
MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒重組載體構(gòu)建完成后與輔助質(zhì)粒一起轉(zhuǎn)染進入包裝細胞。在包裝細胞中，位于兩個長末端重復(fù)序列（LTRs）之間的DNA片段會被轉(zhuǎn)錄成RNA，由輔助質(zhì)粒表達的病毒蛋白將其包裝形成病毒顆粒。包裝后的活體病毒將會被釋放到上清液中，可以直接收集或進一步濃縮病毒轉(zhuǎn)染靶細胞。
當病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細胞時，釋放到宿主細胞中的病毒RNA借助逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄成DNA，然后隨機整合進宿主細胞的基因組中。在病毒載體中，位于兩個LTR的DNA片段和病毒基因組都會穩(wěn)定整合到靶細胞的基因組中。
關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄病毒基因表達載體的更多信息，請參考以下文獻。
| 參考文獻 | 主題 |
|---|---|
| Exp Hematol. 31:1007 (2003) | Review |
| J Virol. 61:1639 (1987) | Extended packaging signal increases the titer of MMLV vectors |
| Gene Ther. 7:1063 (2000) | Tropism of MMLV vectors depends on packaging cell lines |
| Nat Protoc. 6:346 (2011) | Tropism of MMLV vectors depends on packaging plasmids |
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